李文菁,黃月群*,黃亮亮,李向通,蘇瓊源,孫揚(yáng)言
1. 廣西環(huán)境污染控制理論與技術(shù)重點(diǎn)實驗室,廣西 桂林 541004;
2. 桂林理工大學(xué)喀斯特區(qū)域水污染控制和水安全合作創(chuàng)新中心,廣西 桂林 541004;
3. 桂林理工大學(xué)環(huán)境科學(xué)與工程學(xué)院,廣西 桂林 541004
MPs 是一種新型污染物,其分布及其廣泛,河流(Jin et al.,2022;
Samandra et al.,2022)、海洋(Joshy et al.,2022)、土壤(Yang et al.,2022;
Zhao et al.,2022)、空氣(Ding et al.,2022)、動植物,甚至人類食物中均檢測出MPs 成分,MPs在水生、陸地和大氣環(huán)境中的進(jìn)行循環(huán)運(yùn)移,并轉(zhuǎn)移至動植物和人體當(dāng)中。目前,對于MPs 的研究主要側(cè)重于海洋、河流、湖泊等區(qū)域水體、沉積物和土壤中的MPs 分布特征。如朱曉桐等(2018)和龍籍藝等(2021)分別對長江口湖灘和潮間帶的表層沉積物中MPs 的分布特征研究得到,長江口潮間帶植被分布區(qū)沉積物微塑料平均豐度為(0.015±0.002) n·g-1,微塑料平均粒徑分布范圍為(204.4—546.4 μm);
尹詩琪等(2021)對青島近岸表層海水中MPs 的分布特征進(jìn)行的研究,得到青島近岸小粒徑微塑料(<1 mm)的含量最多,白色是青島近岸微塑料的主要顏色,纖維在海水和潮灘沉積物中的含量最高;
Yaranal et al.(2021)研究了印度Karnataka 海岸沉積物中MPs 的分布特征,得到海灘沉積物中的微塑料濃度為[(264±62)—(1 002±174) n·kg-1],5 個海灘的平均豐度為 (664±114) n·kg-1。魚類作為水生環(huán)境中的指示生物,能夠反映水體環(huán)境中MPs 的污染狀況及其分布特征(黃月群等,2022)。Jaafar et al.(2021)通過對馬來西亞商業(yè)海洋魚中MPs 的豐度及其特征進(jìn)行研究,有的學(xué)者通過魚類棲息地、體長體質(zhì)量、飲食習(xí)慣和胃腸道豐度的不同對區(qū)域MPs 的污染狀況及其相關(guān)性進(jìn)行分析(Courtene et al.,2017;
Devries et al.,2020;
Wang et al.,2020;
Cimmaruta et al.,2022)。通過魚類對水生環(huán)境MPs 的污染狀況及其分布特征進(jìn)行分析,能夠更加準(zhǔn)確地認(rèn)識水生環(huán)境MPs 分布特征及其變化規(guī)律,有助于了解塑料在水生環(huán)境的富集狀態(tài)和遷移過程及其相關(guān)因素。
本文以北部灣周邊6 個采樣點(diǎn)為研究區(qū)域,通過提取海洋魚類胃腸道和鰓組織中的MPs 進(jìn)行實驗分析,對北部灣海洋流域中魚類鰓和胃腸道MPs數(shù)量及其分布特征進(jìn)行研究內(nèi)容。通過MPs 風(fēng)險指數(shù)(H)和污染負(fù)荷指數(shù)(PLI),對北部灣MPs污染狀況進(jìn)行風(fēng)險評估,為北部灣開展MPs 污染防治提供參考依據(jù)。
1.1 樣品采集
實驗于2021 年9 月從北部灣6 個區(qū)域采集144尾海魚樣本,采樣點(diǎn)分別為北海(S1)、江洪(S2)、企水(S3)、海口(S4)、白馬井(S5)、崖州(S6)(圖1),每個采樣點(diǎn)均選取了藍(lán)圓鲹(Decapterus maruadsi)、褐籃子魚(Siganusfuscessens)、大吻斜齒鯊(Scoliodonmacrorhychos)和南海帶魚(TrichiurusNanhaiensis)各24 條作為樣本。所有樣品均來自漁民當(dāng)天用拖網(wǎng)捕撈上來的野生魚,用去離子水清洗魚類樣品表面污漬,進(jìn)行分類標(biāo)記后保存于低溫環(huán)境中,用于后期分析實驗。
圖1 中國北部灣采樣點(diǎn)分布圖Figure 1 Distribution map of sampling points in Beibu Gulf, China
1.2 樣品處理
測量魚類樣品全長和體質(zhì)量后,在潔凈臺上進(jìn)行魚類解剖,將GIT 和鰓組織整體解剖放入含有10% KOH 的250 mL 錐形瓶中(溶液體積與組織體積比為6∶1),用鋁箔紙進(jìn)行密封(Tang et al.,2021)。在溫度為60 ℃、轉(zhuǎn)速為90 r·min-1的恒溫水浴振蕩器中持續(xù)48 h 振蕩。采用超純水洗滌3 次后的循環(huán)水式多用真空泵過濾裝置,對消解樣品進(jìn)行過濾和真空抽濾,得到尺寸>500 μm 和50—500 μm 的MPs,將濾膜轉(zhuǎn)移至無污染的培養(yǎng)皿中進(jìn)行烘干。使用MC-D200UVA(C)型號的體式顯微鏡觀察并記錄MPs 的顏色、形態(tài)、粒徑等特征,結(jié)合原位紅外光譜儀和激光拉曼光譜儀分析MPs 化學(xué)性質(zhì)。該實驗得到了桂林理工大學(xué)動物護(hù)理和使用倫理委員會的批準(zhǔn)。
1.3 數(shù)據(jù)處理與分析
采用IBM SPSS、Origin 2018、Arcgis 和Excel完成數(shù)據(jù)統(tǒng)計分析和圖形輸出,對MPs 豐度和魚類特征性指標(biāo)(食性、棲息水層、體長和體質(zhì)量)的差異進(jìn)行顯著性分析(P<0.05 表示顯著相關(guān))。
將MPs 聚合物的化學(xué)毒性作為評價其生態(tài)危害的重要指標(biāo),在東海南部沉積物和長江口地表水中都得到驗證(Xu et al.,2018;
Li et al.,2022)。本研究通過MPs 風(fēng)險指數(shù)、污染負(fù)荷指數(shù)來作為評估北部灣地區(qū)MPs 污染的風(fēng)險指標(biāo)(Lithner et al.,2011)。使用以下公式:
式中:
H——MPs 風(fēng)險指數(shù);
Pn——每個采樣點(diǎn)收集的MPs 類型的占比;
Sn——Lithner et al.(2011)對MPs 的風(fēng)險評分,根據(jù)風(fēng)險指數(shù)(H)和污染負(fù)荷指數(shù)(PLI)風(fēng)險評估方法,以微塑料聚合物簡稱、密度和評分標(biāo)準(zhǔn)見表1。
表1 微塑料聚合物簡稱、密度和評分Table 1 Microplastic polymer abbreviation, density,and scoring
式中:
Fi——每個站點(diǎn)的MPs 濃度因子;
其中:
Ci——每個站點(diǎn)的MPs 濃度;
Coi——最小MPs 濃度;
PLI——污染負(fù)荷指數(shù)。Coi定義為基于最小平均濃度,該值不影響PLI值,本文選取Coi為0.027 items·ind-1(Koongolla et al.,2020)。
1.4 質(zhì)量保障和控制
為避免樣品受到空氣中MPs 的污染,整個實驗過程在超潔凈工作臺上進(jìn)行實驗,嚴(yán)格控制外界MPs 污染、實驗儀器優(yōu)先選擇玻璃制品,所有容器和樣品用錫箔紙密封,且在使用前用去離子水或超純水洗滌3 次以上。為確保實驗的準(zhǔn)確性,每組實驗設(shè)置一個空白組進(jìn)行比較,結(jié)果表明空白組中均未檢測出MPs。
2.1 魚類形態(tài)指標(biāo)及食性特征
本研究在北部灣6 個區(qū)域共選取4 種海洋魚類樣本,其形態(tài)參數(shù)及食性特征見表2。藍(lán)圓鲹和褐藍(lán)子魚棲息于中上層水體,分別為肉食性和雜食性魚類,南海帶魚和大吻斜齒鯊魚棲息于底層水體,且都為肉食性魚類。魚全長范圍為183.13—610.99 cm,體質(zhì)量范圍為64.01—162.60 g。其中藍(lán)圓鰺、褐籃子魚和南海帶魚作為北部灣的優(yōu)勢群種,對北部灣地區(qū)的魚類調(diào)查實驗具有代表性和廣泛性(李淵等,2016;
張文超等,2017;
凌煒琪等,2023)。因此,本研究在每個采樣點(diǎn)均捕撈了這4 種海洋魚類,每種魚樣選取了24 尾進(jìn)行取樣,樣本量滿足統(tǒng)計分析的要求。
表2 北部灣海洋魚類樣本數(shù)據(jù)Table 2 Data of the Beibu Gulf Marine fish samples
2.2 微塑料分布特征
2.2.1 魚類微塑料豐度和粒徑特征
檢測的4 種魚中有46%檢測出MPs,共檢測出70 個MPs,平均每條魚攝入了0.490 個MPs,其中胃腸道MPs 檢出率為36%,平均豐度為0.417 items·ind-1,鰓組織MPs 檢出率為13%,平均豐度為0.069 items·ind-1。
根據(jù)魚類食性分析,得到南海帶魚GIT 內(nèi)的MPs 含量最低,大吻斜齒鯊內(nèi)的MPs 含量最高,雜食性褐藍(lán)子魚體內(nèi)MPs 豐度顯著大于其余3 種肉食性魚類,且所有魚類的胃腸道MPs 豐度大于鰓組織。根據(jù)棲息水層分析結(jié)果,得到中上層水體的魚類MPs 為40 個,GIT 平均豐度為0.472 items·ind-1,鰓平均豐度為0.083 items·ind-1,底層水體的魚類MPs 為30 個,GIT 平均豐度為0.361 items·ind-1,鰓平均豐度為0.056 items·ind-1(圖2a)。魚類MPs粒徑以50—500 μm 為主(91%),有6 個粒徑大于500 μm 的MPs,除藍(lán)圓鰺外,其余魚類GIT 都含有粒徑大于500 μm 的MPs(10%)。其中底層魚類攝入更多大于500 μm 的MPs,魚類鰓中MPs 的尺寸均在50—500 μm 之間(圖2b、c)。
圖2 魚體內(nèi)微塑料的豐度和粒徑特征Figure 2 The abundance and particle size characteristics of the microplastics in fish
2.2.2 魚類微塑料顏色和形狀特征
對魚體內(nèi)的微塑料顏色進(jìn)行分析,得到魚體內(nèi)的MPs 有透明、黑色、紅色、綠色和藍(lán)色共5 種顏色。其中GIT 和鰓中均以紅色、藍(lán)色和透明色為主,紅色占比最大為36%。GIT 中的MPs 紅色、藍(lán)色和透明色分別占35%、18%、28%(圖3a),鰓中的MPs 顏色占比為40%、30%、20%(圖3b)。其中南海帶魚檢測的MPs 顏色最豐富,大吻斜齒鯊中的MPs 顏色種類最少。魚類樣本名稱
圖3 魚體內(nèi)微塑料的顏色和形狀分布Figure 3 Color and shape distribution of microplastics in fish
魚體中檢測出顆粒、碎片和纖維類MPs,纖維占比最多為57%。GIT 中MPs 顆粒占13%、碎片占28%、纖維占59%(圖3c)。鰓中MPs 顆粒占10%、碎片占40%、纖維占50%(圖3d)。其中除南海帶魚檢測出3 種形狀外,其余魚類只檢測到了一種形狀的MPs。
2.2.3 微塑料類型特征
對魚體內(nèi)微塑料類型進(jìn)行檢測分析,檢測到共9 種MPs 化學(xué)組分,主要為PA(Polyamide,聚酰胺)占比17%,PC(Polycarbonate,聚碳酸酯)占比20%,PP(Polypropylene 聚丙烯)占比20%和PS(Polystyrene,聚苯乙烯)占比15%,其部分顯微鏡圖和光譜圖見圖4 和圖5。GIT 中PP 占比最大為22%,鰓中PC 占比最大為30%,鰓中只檢測到7 種MPs(圖6)。其中雜食性褐藍(lán)子魚GIT 和鰓中檢測到的MPs 種類最多,大吻斜齒鯊和藍(lán)圓鰺的鰓中只檢測到了一種MPs。
圖4 魚體內(nèi)部分微塑料顯微鏡圖Figure 4 Micrograph of major microplastics in fish
圖5 魚體內(nèi)部分微塑料光譜圖Figure 5 Spectra of major microplastics in fish
圖6 魚體內(nèi)微塑料化學(xué)組分Figure 6 Microplastic chemical components in fish
2.3 魚類微塑料分布與個體之間相關(guān)性
2.3.1 全長、體質(zhì)量與微塑料豐度相關(guān)性
通過線性回歸對4 種魚體的鰓組織和GIT 中MPs 與魚類全長、體質(zhì)量之間的關(guān)系進(jìn)行分析,結(jié)果發(fā)現(xiàn):胃腸道MPs 豐度與魚類全長相關(guān)性較強(qiáng),且呈負(fù)相關(guān)(r2=0.946,a= -0.013);
胃腸道MPs豐度與魚類體質(zhì)量相關(guān)性弱(r2=0.365,a= -0.604);
鰓中MPs 豐度與魚類全長和體質(zhì)量無相關(guān)性(全長:r2=0.040,a= -0.002;
體質(zhì)量:r2=0.073,a=-0.270)(圖7)。
圖7 魚體中胃腸道和鰓微塑料豐度與魚的全長、體質(zhì)量的相關(guān)性Figure 7 Correlation of gut and gill microplastic abundance with full length and body weight of fish
2.3.2 棲息地、食性與微塑料豐度、尺寸和形狀相關(guān)性
根據(jù)MPs 分布特征可知魚類棲息地和食性與MPs 的尺寸和形狀存在一定的數(shù)量關(guān)系。通過SPSS軟件分析其相關(guān)性,得到雜食性魚類主要攝入的MPs 類型為纖維類,肉食性魚類攝入主要為碎片類MPs;
纖維類大多被中上層魚類攝取,底層魚類多攝取大尺寸碎片和顆粒類MPs。對魚類棲息地、食性與微塑料豐度、尺寸和形狀進(jìn)行Pearson 檢驗結(jié)果得到,豐度與棲息地、食性無相關(guān)性(P=0.157,t=0.244;
P=0.083,t=0.537);
尺寸與豐度棲息地、食性無相關(guān)性(P=0.171,t=0.204;
P= -0.040,t=0.383);
形狀與豐度棲息地、食性無相關(guān)性(P=0.075,t=0.581;
P=0.053,t=0.348)(表3)。
表3 棲息地、食性與微塑料豐度、尺寸和形狀相關(guān)性Table 3 Correlation of habitat, diet between abundance, size and shape of MPs
2.4 微塑料風(fēng)險評估
根據(jù)風(fēng)險評估方法,計算得到北部灣各地區(qū)魚類MPs 風(fēng)險指數(shù)和污染負(fù)荷指數(shù)見表4。結(jié)果表明:采樣點(diǎn)PLI指數(shù)除S5 外均在Ⅱ類風(fēng)險類別范圍,屬于輕度污染,計算得到PLI(zone)=15.73,與表5 微塑料污染風(fēng)險水平標(biāo)準(zhǔn)對照(Xu et al.,2018),說明北部灣區(qū)域內(nèi)的魚類MPs 風(fēng)險類別為Ⅱ類,屬于輕度污染水平。
表4 各采樣點(diǎn)微塑料風(fēng)險指數(shù)、濃度因子和污染負(fù)荷指數(shù)Table 4 MPs risk index, concentration factor and pollution burden index at each sampling point
表5 微塑料污染風(fēng)險水平標(biāo)準(zhǔn)Table 5 Risk level standards of microplastics pollution
3.1 魚類微塑料來源分析
目前,許多國內(nèi)外學(xué)者在海洋魚類中檢測得到,大部分魚類樣本中的MPs 以透明色纖維MPs 為主(Lusher et al.,2013)。本研究檢測得到北部灣4種海洋魚類GIT 和鰓組織中以紅色纖維MPs 占比最多,透明碎片MPs 其次,說明北部灣區(qū)域MPs污染主要來源于漁業(yè)捕撈造成的次生MPs,如漁網(wǎng)、捕魚籠在環(huán)境中經(jīng)過機(jī)械剝蝕、化學(xué)侵蝕等作用所產(chǎn)生的塑料纖維。栗志民等(2010)研究結(jié)果得到纖維狀MPs 大量存在與周圍頻繁的漁業(yè)捕撈和廣泛的水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)有關(guān),以及國外研究人員得到捕魚活動和MPs 豐度之間有很強(qiáng)的正相關(guān)性的結(jié)果(Dowarah et al.,2019;
Wright et al.,2021)。本研究發(fā)現(xiàn)區(qū)域魚類樣本MPs 以PC 和PP 為主,而PP是一種常被用作薄膜、食品容器、汽車和電子零件等物品的材料,PC 則被用于電子電器、醫(yī)療器材和建筑材料等工業(yè),以及發(fā)現(xiàn)PA 和尼龍等用于漁網(wǎng)制作的材料,表明北部灣區(qū)域MPs 污染主要來源于以上人工材料。
在Wei et al.(2022)調(diào)查廈門市魚類MPs 污染研究中發(fā)現(xiàn)有6 家污水處理廠在樣本采集區(qū)附近,導(dǎo)致海水和魚類中的人造纖維含量較高。目前中國污水技術(shù)能夠一定程度上去除生活用水中的MPs及其污染物,但還有大部分MPs 殘留在水環(huán)境當(dāng)中,成為海洋魚類攝取MPs 的通道。在本研究區(qū)域中,污水處理廠則為魚體內(nèi)MPs 來源的場所之一,在北海地區(qū)有一家北海市大冠沙污水處理廠,其中無法處理的MPs 進(jìn)入湖泊和海洋。另外,北部灣海岸區(qū)域的漁業(yè)活動和生活垃圾中所導(dǎo)致的塑料制品也是該區(qū)域魚體內(nèi)MPs 的來源,這些MPs 在洋流等影響下匯聚并被魚類攝入,使其在魚類胃腸道和鰓組織中富集。
3.2 魚類微塑料分布與個體相關(guān)性分析
本研究經(jīng)過魚類食性和棲息水層分類研究魚樣MPs 豐度、尺寸和形狀組成情況,結(jié)合相關(guān)性得到雖然棲息地和食性與MPs 的豐度、尺寸和形狀存在一定的數(shù)量關(guān)系,但通過樣本相關(guān)性分析得出無相關(guān)性,表明魚類攝取MPs 豐度、尺寸和形狀與魚類棲息地和食性無關(guān)。然而,在Wang et al.(2021)和Parvin et al.,(2021)的研究結(jié)果表明雜食性魚類的MPs 含量明顯多于肉食性魚類。也有研究得出肉食性魚類的MPs 攝入量要高于草食性和雜食性魚類,更高營養(yǎng)水平的生物體可能通過生物積累更多的MPs(Wootton et al.,2021)。因此,攝取MPs的影響因素存在較大不確定性,需更為全面系統(tǒng)的調(diào)查研究。另外,通過樣本相關(guān)性分析得到魚類樣本胃腸道MPs 豐度與攝取MPs 豐度魚樣全長相關(guān)性較強(qiáng),而與體質(zhì)量相關(guān)性弱;
鰓組織中MPs 豐度與全長和體質(zhì)量均不相關(guān),說明魚類的體質(zhì)量不是影響魚體內(nèi)MPs 豐度分布特征的因素。
3.3 魚類微塑料風(fēng)險評估分析
在靳非等(2021)的研究中得到海水青鳉魚長期暴露在聚苯乙烯MPs 中,對其親代的生長、繁殖和子代胚胎發(fā)育具有不利影響,說明長期暴露在含有MPs 環(huán)境中,會對魚類造成潛在的健康風(fēng)險。通過MPs 風(fēng)險指數(shù)和污染負(fù)荷指數(shù)評估北部灣海洋魚類MPs 風(fēng)險程度,污染風(fēng)險的增加依賴于環(huán)境中MPs 高濃度的積累。得到的MPs 污染風(fēng)險類別結(jié)果發(fā)現(xiàn),北海(S1)、江洪(S2)、企水(S3)、海口(S4)和崖州(S6)風(fēng)險類別為Ⅱ類,屬于輕度污染水平,但白馬井(S5)風(fēng)險類別為Ш 類,說明白馬井區(qū)域微塑料污染程度更嚴(yán)重,表現(xiàn)為該區(qū)域有更多種類和化學(xué)毒性更強(qiáng)的塑料聚合物。雖然本研究結(jié)果得到北部灣區(qū)域魚類樣本MPs 總體處于輕度污染水平,但長時期處于高濃度MPs 暴露的環(huán)境下,對魚類具有巨大的潛在危害。
本文對北部灣周邊區(qū)域海洋魚類的GIT和鰓組織中的MPs 進(jìn)行量化分析,得到魚類MPs 豐度、粒徑、顏色和形狀特征。發(fā)現(xiàn)棲息地和食性與MPs的豐度、尺寸和形狀存在一定的數(shù)量關(guān)系,但不存在顯著相關(guān)性,表明魚類攝取MPs 豐度、尺寸和形狀與魚類棲息地和食性無關(guān),而魚全長與魚樣MPs豐度存在顯著相關(guān)性,表明魚類全長會影響魚類攝食MPs 數(shù)量的多少。根據(jù)MPs 風(fēng)險評估反映了北部灣區(qū)域海洋魚類MPs 風(fēng)險類別為Ⅱ?qū)儆谳p度污染,雖然魚類胃腸道和鰓組織會在烹飪過程中去除,但有些體型較小的魚類和軟體生物可以直接食用,因此不能排除MPs 對人類的健康風(fēng)險。且小尺寸的MPs 會通過GIT 和鰓組織轉(zhuǎn)移到其它食用組織當(dāng)中,使食用者暴露在MPs 污染的威脅下。因此,在今后的研究應(yīng)對MPs 及其攜帶的污染物對攝食生物的影響進(jìn)行探討,深入挖掘MPs 在水生生物病理學(xué)的影響機(jī)制及其響應(yīng)原理。
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