對照組，比較兩組患者HPV分型和血清微量元素水平，分析宮頸疾病患者HPV分型和血清微量元素臨床特征。 結果 研究組HPV陽性率高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。研究組HPV類型為HPV18、16、31、33、52、58、59和6，對照組HPV類型為HPV33、52、58、66、68和6、11、43。研究組高危型HPV陽性例率高于對照組，兩組HPV感染分型比較，差異有統計學意義（P < 0.05）。Spearman相關性分析發現，宮頸細胞學異常與HPV感染及高危型HPV感染均呈正相關（r = 0.403、0.468，均P < 0.05）。研究組單一感染陽性率高于對照組，差異有統計學意義（P < 0.05）。研究組血清鎘元素、鎳元素、砷元素、銅元素水平高于對照組，血清鋅元素和硒元素水平低于對照組，差異均有高度統計學意義（P < 0.01）。Logistic回歸分析發現銅元素≥28.73 μmol/L是宮頸細胞學異常的獨立危險因素，而鋅元素≥71.96 μmol/L和硒元素≥36.47 μg/L對機體起到保護作用（P < 0.01）。 結論 宮頸疾病患者宮頸細胞學異常與HPV感染分型、血清鋅、硒和銅元素水平異常密切相關。

[關鍵詞] 宮頸疾病;宮頸癌;癌前病變;人乳頭瘤病毒;微量元素

[中圖分類號] R737.33          [文獻標識碼] A          [文章編號] 1673-7210（2019）10（c）-0106-04

Analysis on type of HPV infection and detection of trace elements in patients with cervical diseases

SI Baihui1   LIU Haixia1   SI Fan2   WAN Hui1

1.Department of Gynecology， Chengde Central Hospital， Hebei Province， Chengde   067000， China; 2.Department of Reproductive Medicine， Chengde Central Hospital， Hebei Province， Chengde   067000， China

[Abstract] Objective To investigate the typing of human papillomavirus （HPV） infection in patients with cervical diseases and the effect of trace elements. Methods From December 2017 to December 2018， 600 patients with abnormal cervical cytology admitted to Chengde Central Hospital in Hebei Province were selected as the study group， and 360 patients with chronic cervicitis at the same time were selected as the control group. HPV typing and serum trace elements levels were compared and the clinical characteristics of HPV typing and serum trace elements in patients with cervical diseases were analyzed. Results The positive rate of HPV in the study group was higher than that in the control group （P < 0.05）. The types of HPV in the study group were HPV18， 16， 31， 33， 52， 58， 59， 6. The types of HPV in the control group were HPV33， 52， 58， 66， 68， 6， 11， 43. The positive rate of high-risk HPV in the study group was higher than that in the control group. HPV infection types was compared between two groups， the difference was statistically significant （P < 0.05）. Spearman correlation analysis showed that cervical cytology abnormalities were positively correlated with HPV infection and high-risk HPV infection （r = 0.403， 0.468， all P < 0.05） . The positive rate of single infection in the study group was higher than that in the control group （P < 0.05）. The levels of serum cadmium， nickel， arsenic and copper in the study group were higher than those in the control group， the levels of serum zinc and selenium in the study group were lower than those in the control group， the differences were highly statistically significant （P < 0.01）. Logistic regression analysis showed that copper > 28.73 μmol/L was an independent risk factor for cervical cytological abnormalities， while zinc > 71.96 μmol/L and selenium > 36.47 μg/L had protective effects （P < 0.01）. Conclusion Cervical cytological abnormalities in patients with cervical diseases are closely related to HPV infection typing， serum zinc， selenium and copper levels.

[Key words] Cervical diseases; Cervical cancer; Precancerous lesions; Human papillomavirus; Trace elements

宮頸癌是婦科常見惡性腫瘤，其發病率逐年遞增[1]。國內每年新發病例為13萬～14萬例，死亡病例在3000例以上[2]。性生活開始的2年內，超過50%的女性會感染人乳頭瘤病毒（HPV），且性生活頻率越高的女性感染率越高[3]。HPV持續感染是宮頸癌發生的主要和必需因素，與其相關的HPV亞型高達100余種[4]。較多研究認為宮頸癌是目前唯一有望消滅的惡性腫瘤。而臨床發現不同亞型HPV導致宮頸細胞學異常的風險不同[5]。除HPV感染外，微量元素等潛在危險因素也參與癌前病變及宮頸癌的發生、發展[6]。本研究分析了不同宮頸疾病患者HPV感染分型和血清微量元素水平，現將結果報道如下：

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年12月～2018年12月河北省承德市中心醫院（以下簡稱為“我院”）收治的宮頸細胞學異常患者600例作為研究組，年齡23～78歲，平均（49.65±10.32）歲，妊娠（2.78±0.82）次;另取同期收治的慢性宮頸炎患者360例作為對照組，年齡27～76歲，平均（50.15±9.79）歲，妊娠（2.73±0.95）次。研究組納入標準：病理檢查明確診斷為宮頸細胞學異常者。排除標準：①術后行進一步補充治療者;②既往采用化療或放療治療者;③既往治療后未控制或復發者;④服用激素類藥物或避孕藥者;⑤合并其他惡性腫瘤者;⑥有金屬接觸史。對照組納入標準：①符合《中華婦產科學》[7]中慢性宮頸炎診斷標準者;②宮頸液基細胞學檢查未見異常者。排除標準：①無性生活史;②既往診斷為宮頸病變后接受治療者;③合并其他惡性腫瘤;④未服用激素類藥物或避孕藥者;⑤有金屬接觸史。兩組患者年齡及妊娠次數比較，差異無統計學意義（P > 0.05），具有可比性。本研究經我院醫學倫理委員會批準。

1.2 實驗方案

1.2.1 HPV分型檢測  標本采集前24 h內禁止陰道內用藥或性生活，患者取截石位，充分消毒宮頸外口和外陰，將宮頸表面分泌物擦拭干凈，隨后用細胞刷在宮頸外口上方10～12 mm處旋轉1周，將細胞刷在采集管中洗脫，提取HPV-DNA，聚合酶鏈式反應（PCR）擴增基因，按HPV核酸分型檢測試劑盒（上海透景生命科技股份有限公司，生產批號：20171132）說明書進行核酸分子快速雜交，檢測HPV6、11、16、18、31、33、35、39、42、43、44、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83等23種亞型。

1.2.2 微量元素檢測  入組后24 h內采集患者空腹靜脈血5 mL，血清分裝后，-20℃保存，按微量元素鑒定標準測定，標準品由國家標準物質檢測中心提供，檢測儀器為電感耦合等離子體原子發射光譜儀（Integra XL）。

1.3 統計學方法

采用SPSS 18.0統計學軟件進行數據分析，計量資料用均數±標準差（x±s）表示，兩組間比較采用t檢驗;計數資料用率表示，組間比較采用χ2檢驗。多因素相關性分析采用Logistic回歸分析，相關性分析采用Spearman分析法。以P < 0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者HPV感染分型情況

研究組516例（86.00%）患者為HPV陽性，對照組162例（45.00%）患者為HPV陽性，兩組HPV陽性率比較差異有統計學意義（χ2 = 182.311，P < 0.05）。研究組患者HPV類型為HPV18、16、31、33、52、58、59和HPV6，對照組患者HPV類型為HPV33、52、58、66、68和HPV6、11、43。研究組高危型HPV陽性共452例（87.60%），對照組高危型HPV陽性共68例（41.98%），兩組HPV感染分型比較，差異有統計學意義（χ2 = 235.446，P < 0.05）。見表1。Spearman相關性分析發現，宮頸細胞學異常與HPV感染及高危型HPV感染均呈正相關（r = 0.403、0.468，P < 0.05）。

2.2 兩組患者感染情況

研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽率低于對照組，差異有統計學意義（χ2 = 135.776，P < 0.05）。見表2。

2.3 兩組患者血清微量元素比較情況

研究組血清鎘元素、鎳元素、砷元素、銅元素水平高于對照組，血清鋅元素和硒元素水平低于對照組，差異均有高度統計學意義（P < 0.01）。見表3。

2.4 Logistic回歸分析結果

Logistic回歸分析發現銅元素≥28.73 μmol/L是宮頸細胞學異常的獨立危險因素，而鋅元素≥71.96 μmol/L和硒元素≥36.47 μg/L對機體起到保護作用（P < 0.01）。見表4。

3 討論

本研究對960例宮頸疾病患者HPV感染分型進行觀察，結果發現共有678例患者檢出HPV，陽性率為70.63%。同時發現，研究組HPV陽性率高于對照組，提示宮頸細胞學異常與HPV感染有關;研究組HPV亞型以高危型為主，對照組以低危型為主;統計學分析也證實，研究組高危型HPV陽性率高于對照組。Spearman相關性分析發現，宮頸細胞學異常分別與HPV感染及高危型HPV感染呈正相關性，提示HPV感染及高危型HPV感染與患者發生宮頸細胞學異常密切相關[8]。

HPV亞型高達100余種，且各亞型間基本無交叉保護抗體，二重或多重感染在臨床上極為常見[9-10]。研究發現，研究組單一感染陽性率高于對照組，多重感染陽性率低于對照組。與Wentzensen等[11]研究結果一致，宮頸病變患者多以高危HPV亞型單一感染為主。研究組單一感染主要為高危HPV亞型，占比高達85.13%，提示單純高危型HPV感染導致宮頸細胞學異常的風險更高。也有研究認為高危型HPV和低危型HPV對宮頸致病的潛伏時間不同可能是導致多重感染與單一感染分布差異的重要原因[12]。

微量元素有助于維持機體各器官的正常運轉。微量元素處于健康濃度時，經相應的酶消除體內自由基;平衡狀態打破后，常導致正常細胞損傷及病毒感染[13]。鋅元素缺乏可引起外陰部、肛門及口眼等部位發生丘疹、發紅、濕疹;鐵元素缺乏可引起缺鐵性貧血。目前關于微量元素變化對宮頸細胞學異常的影響機制尚無定論。可以明確的是，微量元素對核酸和細胞的結構穩定性、機體免疫力均有重要影響[14-15]。微量元素可能通過影響HPV感染、機體免疫反應等過程影響宮頸細胞學異常的發生、發展。徐又先等[16]研究發現，年輕女性宮頸癌致病因素中，硒和鋅等微量元素水平低時效應微弱，一旦與高危型HPV感染或其他強致癌因素結合時，將出現明顯增效作用。有研究發現，維吾爾族女性高危型HPV感染率低于漢族女性，而宮頸癌發病率和病死率均顯著高于漢族婦女，推測與維吾爾族女性體內微量元素水平異常有關[17]。

本研究發現，銅≥28.73 μmol/L是宮頸細胞學異常的獨立危險因素，而鋅≥71.96 μmol/L和硒≥36.47 μg/L對機體起到保護作用。銅是金屬酶的必要元素，介導神經、內分泌、呼吸等多個生理過程，對促進多種酶合成并維持其活性有著重要作用。目前已知卵巢癌、肝癌、胃腸道癌及乳腺癌等多種惡性腫瘤中銅元素均表現為異常增高，且隨病情惡性程度的增高而增高[18]。銅元素對DNA的G-C堿基對有直接破壞和致突變作用，也可產生自由基導致部分腫瘤抑制基因失活或消失，因此其水平異常增高可能導致宮頸細胞學異常的發生[19]。硒元素是自由基捕獲劑，有助于抑制致癌物引起的染色體斷裂。此外，硒元素對腫瘤細胞的增殖過程也有一定抑制作用[20]。HPV感染率會隨著血清硒元素含量的升高呈現下降趨勢，兩者間存在劑量反應關系[21]。鋅元素是基因表達的關鍵元素，其含量降低可導致p53基因等促腫瘤生物信號過表達，影響DNA的完整性，進而促發腫瘤[22]。同時，鋅元素對T細胞輔助因子合成過程具有抑制作用也可導致機體免疫監視功能紊亂，無法逆轉癌變生物信號，導致腫瘤發生[23]。而鋅元素和硒元素血清水平增高時，以上癌變過程均可得到有效控制，提示鋅元素和硒元素血清水平增高是宮頸細胞學異常保護因素的主要原因。陶華等[24]的研究發現對高危型HPV感染患者的全身血細胞和微量元素的變化檢測同時進行早期干預，可能是臨床上預防宮頸癌行之有效的方法。

綜上所述，宮頸疾病患者宮頸細胞學異常與HPV感染分型、血清鋅、硒和銅元素水平異常密切相關，但宮頸細胞學異常與以上因素間的因果關系有待進一步研究。

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（收稿日期：2019-04-11  本文編輯：任   念）

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